Ako sa pripraviť na agarové platne

Molekulárna biológia a bakteriológie pomocou agarového platne s kultúrou mikroorganizmov, ako sú baktérie pre experimentovanie. Agar je látka, ktorá stuhne, alebo gély, tekuté živné prostredie vyžaduje, aby bol mikroorganizmus prežiť a rásť. Po prevode na agarového miske, baktérie rastú v rôznych kolónií (ak rastie v nízkych koncentráciách), alebo (v prípade, šmuhy pestované vo vysokých koncentráciách), a môže byť zozbieraná pre analýzu. Biológovia pripraví agarového platne, ako tento proces si vyžaduje prístup k laboratórnej kvality chemikálií a strojov a dobrú znalosť molekulárnej biológie a sterilné techniky. To, čo budete potrebovať
rukavice
Laboratórne plášť
tvárová maska ​​
Bunsen horák
Laminárne kapucňa
sterilnej Petriho misky
10g bacto-tryptón
5 g kvasnicový extrakt
15g agarózovom
1 ml 1N NaOH
sterilnej destilovanej vody
Sklenená fľaša
Autoklávy páska
Autoklávy
doplnky, napr antibiotiká ako ampicilín
Zobraziť ďalšie inštrukcie
1

Položiť riadne ochranné prostriedky, vrátane rukavíc, laboratórny plášť a masku a dekontamináciu všetky povrchy. Práca popri Bunsenovým horákom alebo s výhodou, v sterilnej laminárnym prúdenia. Tým sa zabráni škodlivým látkam vo vzduchu pred pádom do agaru.
2

Odstráňte stoh Petriho misiek z ich obalu, ale šetriť na zabalenie agarových platní. Označte vonkajšieho povrchu misky (nie veko) s typom agaru a dátum prípravy. Položte dosky tak, ako v jednej vrstve s vekami odstránené, aby nalievanie agaru jednoduchšie.
3

Zmiešajte Bacto-tryptón, výťažok z kvasníc a agarózovom spolu a potom pridajte hydroxid sodný (NaOH). Pridajte sterilný destilovanou vodou pre získanie 1l živných médiách. Tento roztok sa prenesie do sklenenej fľaše s najmenej 1,5 l objemu. Voľne zaskrutkujte viečko fľaše a označiť dátum výroby a meno médií. Umiestnite pás autokláve pásky na fľaše a sterilizovať v autokláve počas 25 minút je. Nechajte fľašu cool nie nižšou ako 45 stupňov Celzia (alebo to stvrdne predčasne), ale nie je vyššia ako 50 stupňov Celzia. Môžete uložiť fliaš ochladí a stuhne agare pri 4 stupňoch Celzia a teplý až skvapalneného. Ak je to nutné pre konkrétne experiment alebo líniu baktérií, pridajte vhodný typ a množstvo doplnok, ako sú antibiotiká. Ak je médium príliš horúca, budú doplnky zničená, tak starostlivo skontrolujte teplotu média pred pokračovaním.
4

nalejte dostatočné množstvo agaru na polovicu naplniť misky, kým agar je ešte teplé a skvapalnený. Uistite sa, že povrch je úplne pokrytý. Nelejte príliš veľké množstvo alebo nechať agar dostať na vrchol paraboly. Udržujte taniere v sterilnom prostredí tým, že sa horák Bunsen alebo laminárne prúdenie kapucne bežať nepretržite. Nechajte dosky nastaviť, a potom nahradiť viečka.
5

Vysušte agarových platní asi 30 minút až hodinu v rúre nastavený nie je vyššia ako 37 stupňov Celzia. Prípadne môžete nechať v laminárnym prúdenia po dobu troch minút, alebo na dezinfikovaného laboratórnom stole v low-dopravnej oblasti, ktorá nie je prievan za deň alebo dva. Sušenie dosky sa zastaví akejkoľvek bakteriálnej riešenie umiestnené na povrchu agaru od jednoducho riedenie von a skĺznutiu, namiesto vytvárania kolónií, ktoré sa držia na agare.
6

starostlivo ukladať dosky v tme pri 4 stupňov Celzia. Stack sušené agarové platne s ich dna až vám umožní jasne vidieť štítky a aby sa zabránilo mikroorganizmy a nečistoty z pádu na povrchu agaru a znečistenia je. Vložte riad späť do obalu, prikryjeme alobalom a pásky obaly zatvorené. Označte zabalené dosky s ich obsahom a dátum prípravy. Môžete ukladať dosky pre až dva mesiace a mala zbaviť sa ich po tom.