Protokoly pre farbenie Hoechst

Hoechst škvrny fluorescenčné farbivá používané na označovanie DNA a RNA pomocou fluorescenčnej mikroskopie a metód prietokovej cytometrie. Hoechst 33258 a Hoechst 33342 ar najpoužívanejšie týchto škvŕn. Majú schopnosť viazať na molekuly DNA, čo jadrá a mitochondrií sa fluorescenčné pod ultrafialovým svetlom. Protokoly pre farbenie Hoechst je bežná prax v biotechnologických laboratóriách a genetiky, a zahŕňajú techniky zafarbenie buniek pomocou ako Hoechst 33258 a Hoechst 33342. Hoechst 33342 HSC farbenie a kmeňových buniek čistenie Protokol

Tento protokol sa používa na farbenie buniek z myší kostnej drene. Technici pripraviť vzorku kostnej drene s HBSS + soľný roztok, pufer HEPES a plodové teľacie sérum. Oni sa točí riešenie a pridať do predhriateho média DMEM. Hoechst škvrna sa pridá. Riešenie je umiestnený v 98,6 stupňov Celzia vo vodnom kúpeli za presne 90 minút ohlási Ústavu imunológie na univerzite v Pittsburghu. Úseky DNA objavia svetielkujúce pod cytometra.
Hoechst 33342 DNA farbením

Počas tohto protokolu, technici pozastavené Hoechst 33342 škvrna v destilovanej vode, pridáme 2 percentá plodové teľacie sérum bunky vzorka, udržiavanie pH na 7,2 pomocou roztoku pufra. Bunky sa inkubujú pri 98,6 stupňov F na hodinu, a analyzovať okamžite s kusom zariadenie zvané cytometer.

Farebnej DNA je potom viditeľná a žiarivky, podľa University of Michigan zdravotníckeho systému.


detekcie DNA pomocou DNA-väzbovú fluorochrómy Hoechst 33258

používajú protokoly kus zariadenia s názvom spektrometer pre analýzu DNA a RNA segmenty. Technici používajú Hoechst 33258 fungujúce riešenie a lýtkové Thymus vzoriek DNA. Sú vhodné aj ako oddelené riešenie s využitím DNA vzorky a chemické látky nazývané Etídiumbromid. Neskôr sa porovnať výsledky zafarbenie buniek v oboch médiách, použitie spektrofotometra, podľa Current Protocols in cytometrie.