Prečisťovacie Technika

prekrvenie technika umožňuje rýchle a rovnomerné upevnenie do všetkých jednotlivých buniek prítomných v tkanive. 4 percentá paraformaldehyd upínacie prechádza cez cievny systém k získaniu tkaniva záujmu. Hlavným cieľom miesto pre podávanie liekov v konkrétnom orgáne môžu byť identifikované pomocou tejto techniky. Perfúzie tiež pomáha vedcom pochopiť štrukturálne a funkčné usporiadanie ľudského mozgu. Veci, ktoré budete potrebovať
zviera (potkan alebo opica)
perfúzie čerpadlo, kadička
fixatív (4 percentá paraformaldehyd)
injekčnej ihly
perfúzie odkvapkávacia stanovenej
Nožnice
Skalpel
Kliešte
0,9 percenta soľný internete Ľadový box
Zobraziť ďalšie inštrukcie
1

pripravte čerstvý 4 percentá paraformaldehydu zmiešaním 40 g paraformaldehydu v 800 ml vody. Roztok sa privedie na teplotu 60 ° C za stáleho miešania. Roztok sa ochladí na 4 ° C. Hodnota pH sa upraví na 9,5 pomocou pH-metra. Pre nastavenie pH, pridajte ľadovej kyseliny octovej na dosiahnutie požadovaného pH
2

Nastaviť prečisťovacie pumpou. Pripojiť všetky sklenené časti a prečisťovacie ihlu. Spustiť 100ml vody z vodovodu trubičkami perfúzie čerpadla odstráňte všetky zvyšky zo sklenených dielov. Umiestnite kadičku fixačné ľadové pole.
3

Otvorte koniec perfúzie trubice a umiestnite ho do fixačnej kadičky. Mierka množstvo roztoku v závislosti na veľkosti zvieraťa. Teraz nastavte perfúzie ventil čerpadla k pomalým, rovnomerným kvapkanie. Zatvorte ventil. Naplňte perfúzie prístroj s 0,9 percenta (hmotnosť /objem) soľnému roztoku.
4

Nastavte chirurgické nástroje blízkosti operačnom stole. Dajte anestézia injekciu do zvieraťa podľa jeho telesnej hmotnosti (ketamín 0,5 mg /kg). Položte zviera na operačnom stole s jeho chrbtom nadol.
5

Vykonajte rez skalpelom, pozdĺž membrány. S veľkými nožnice, tupý stranou dole, znížiť spojivového tkaniva na spodnej strane membrány. Vystaviť srdce. Držte tlčúce srdce s kliešťami a vložte ihlu do ľavej komory.
6

Otvorte ventil na perfúznou pumpy, aby tok 0,9 percenta fyziologického roztoku. Uistite sa, že roztok tečie a zviera je živý. Srdce zvierat by mala byť trvalo biť. Akonáhle je krv nahradená soľným roztokom, zmeňte riešenie 4 percentá paraformaldehydu.
7

zastaviť prekrvenie a pitvať tkaniva záujmu. Uchovávajte tkaniva v rovnakom médiu pri teplote 4 ° C.